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ELISA實(shí)驗(yàn)以其靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，就有可能產(chǎn)生不準(zhǔn)確的結(jié)果。今天我們就來(lái)介紹一下實(shí)驗(yàn)中加樣可能會(huì)碰到的問題。
1、加樣時(shí)間過長(zhǎng)（特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)）。遇到這種情況，如果標(biāo)本為血清的話，可以將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；如果標(biāo)本為血漿，就必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2、手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱的時(shí)候需要等待。如果標(biāo)本較多時(shí)，可以分批操作，加樣后一定要及時(shí)放入孵箱。
3、加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外，血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣。遇到這種情況，可以在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，請(qǐng)選擇FAME或其他處理儀器加酶試劑。
為了得到準(zhǔn)確的結(jié)果，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行加樣，同時(shí)做好室內(nèi)質(zhì)控，要以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度檢測(cè)每一份標(biāo)本。
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