1、靈敏度高
可檢測皮克(pg)級起始模板,擴增后產(chǎn)物達到微克(μg)水平,可檢出單個靶細胞或3個病毒顆粒?26。
2、簡便、快速
只需要一次性將反應(yīng)液加好后,就可以進行擴增。一般 2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
3、特異性強
基于引物與模板DNA的精準(zhǔn)結(jié)合,引物設(shè)計通常覆蓋靶序列的4-6個特異性區(qū)域,確保非匹配序列無法擴增?12;Taq DNA聚合酶的忠實性及高溫退火條件進一步減少非特異性結(jié)合?28。
4、純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及 RNA 均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗漱液、毛發(fā)、細胞、活組織等 DNA 擴增檢測。